Kromatografi kolom HPLC
2. Kolom Kromatografi (Jenis Rotasi)
3. Kolom Kromatografi (Manual)
*** Daftar harga untuk seluruh di atas, tanyakan kami untuk mendapatkan
Deskripsi
Parameter teknis
Kromatografi kolom HPLC, juga dikenal sebagai kromatografi cair kinerja tinggi (kromatografi cair kinerja tinggi), adalah kromatografi cair kolom dengan efisiensi pemisahan yang tinggi, dan juga merupakan cabang penting dari kromatografi.
Ini memisahkan komponen dalam sampel sesuai dengan perbedaan gaya adsorpsi dan koefisien partisi antara fase tetap dan fase gerak. Di bawah sistem infus bertekanan tinggi, fase gerak (biasanya pelarut tunggal atau campuran pelarut dengan polaritas yang berbeda) dipompa ke dalam kolom yang mengandung fase diam. Ketika setiap komponen dalam sampel melewati kolom kromatogram, karena ukuran dan kekuatan interaksi yang berbeda dengan fase stasioner (seperti adsorpsi, distribusi, eksklusi, afinitas), waktu tinggal dalam fase diam juga berbeda, sehingga dapat mencapai pemisahan masing -masing komponen. Komponen yang terpisah kemudian memasukkan detektor untuk deteksi, sehingga mendapatkan informasi kualitatif dan kuantitatif dari masing -masing komponen.
Parameter
Aplikasi dalam analisis farmasi
Penerapan kromatografi kolom HPLC dalam analisis obat
Sebagai teknologi analisis pemisahan yang penting, kromatografi cair kinerja tinggi (HPLC) telah menunjukkan potensi dan nilai aplikasi yang hebat di bidang analisis farmasi sejak pengembangannya yang cepat pada tahun 1970 -an. Menggabungkan prinsip pemisahan kromatografi cair klasik dan kromatografi gas, HPLC telah menjadi alat yang sangat diperlukan dalam analisis obat untuk pemisahan yang efisien, analisis cepat, sensitivitas deteksi yang sangat baik dan berbagai aplikasi.
Prinsip dan Karakteristik Dasar
Ini menggunakan interaksi fase tetap dan bergerak untuk secara bertahap memisahkan komponen campuran yang berbeda. Fase stasioner dapat berupa padatan atau cairan yang melekat pada padatan, sedangkan fase gerak adalah cairan atau gas. Dalam HPLC, pelarut dipaksa melalui kolom pada tekanan tinggi hingga ratusan atmosfer, sangat meningkatkan efisiensi pemisahan. Menurut mekanisme pemisahan yang berbeda, HPLC dapat dibagi menjadi HPLC fase normal, HPLC fase terbalik, pertukaran ion HPLC dan volume eksklusi HPLC. Setiap jenis memiliki ruang lingkup aplikasi spesifik dan mekanisme pemisahan, seperti HPLC fase normal untuk memisahkan analit berdasarkan polaritas, dan hPLC fase terbalik untuk memisahkan menggunakan interaksi hidrofobik.
Karakteristik kromatografi kolom HPLC terutama tercermin dalam aspek -aspek berikut:
Efisiensi Pemisahan Tinggi: HPLC memungkinkan pemisahan campuran kompleks yang efisien berkat pompa infus bertekanan tinggi dan kolom kinerja tinggi.
Sensitivitas Tinggi: Detektor modern, seperti detektor penyerapan ultraviolet, detektor fluoresensi, detektor spektrometri massa, dll., Membuat HPLC memiliki sensitivitas deteksi yang sangat tinggi.
Berbagai aplikasi: HPLC tidak dibatasi oleh volatilitas dan stabilitas termal sampel, dan dapat menganalisis zat aktif fisiologis termal yang tidak stabil dengan titik didih yang tinggi dan tidak mudah diuapkan.
Tingkat otomatisasi yang tinggi: Sebagian besar instrumen HPLC modern dilengkapi dengan sampler otomatis dan prosesor data, yang dapat mewujudkan otomatisasi analisis dan pemrosesan data yang cepat.
 |
 |
 |
 |
Aplikasi spesifik dalam analisis obat
HPLC dapat digunakan untuk analisis komposisi obat untuk menentukan bahan aktif dan kotoran obat yang berbahaya. Misalnya, melalui analisis flavonoid, alkaloid dan bahan aktif lainnya dalam bahan obat Cina, jenis dan isi bahan aktif dapat ditentukan untuk memastikan kualitas dan kemanjuran obat. Selain itu, HPLC juga dapat digunakan untuk analisis komposisi obat dalam bentuk dosis farmasi barat, seperti suntikan, tablet, kapsul, dll., Untuk memastikan bahwa komposisi obat dalam obat memenuhi persyaratan yang ditentukan.
HPLC memainkan peran penting dalam penentuan konsentrasi obat. Dengan secara tepat menentukan kandungan obat dalam suatu obat, keamanan dan efektivitas obat dapat dipastikan. Sebagai contoh, dalam analisis obat antibiotik, HPLC dapat digunakan untuk menentukan kandungan antibiotik obat untuk mengevaluasi efek antibakteri obat. Selain itu, HPLC juga dapat digunakan untuk menentukan konsentrasi obat dalam organisme, seperti plasma, urin, jaringan dan sampel biologis lainnya, untuk mengevaluasi kemanjuran dan reaksi merugikan obat.
HPLC juga memainkan peran penting dalam evaluasi kualitas obat. Dengan membandingkan data analitik dari berbagai batch obat, dimungkinkan untuk mengevaluasi apakah kualitas obat stabil. Selain itu, HPLC juga dapat digunakan untuk mempelajari kemanjuran dan karakteristik farmakokinetik obat baru, memberikan dasar ilmiah untuk pengembangan dan pemasaran obat -obatan baru. Sebagai contoh, pada tahap pengembangan obat baru, penyerapan, distribusi, metabolisme dan ekskresi obat baru pada hewan dapat ditentukan oleh HPLC, sehingga dapat memahami kemanjuran dan karakteristik farmakokinetik obat baru, dan memberikan dukungan yang kuat untuk uji klinis dan aplikasi pemasaran obat baru.
Obat kiral merujuk pada molekul obat dengan pusat kiral, dan enansiomernya dapat bervariasi secara signifikan dalam aktivitas in vivo, metabolisme dan toksisitas. Oleh karena itu, sangat penting untuk mengisolasi dan menentukan enansiomer obat kiral. Kromatografi ini memainkan peran penting dalam analisis obat kiral. Dengan memperkenalkan fase stasioner kiral atau aditif fase gerak kiral, enansiomer obat kiral dapat dipisahkan dan ditentukan secara efektif. Sebagai contoh, untuk obat asam amino aktif secara optik, enansiomer yang berbeda dapat dipisahkan dan ditentukan oleh kromatografi ini untuk mengevaluasi aktivitas biologis dan toksisitas obat.
Obat -obatan alami berasal dari berbagai sumber dengan komposisi kompleks dan mungkin mengandung berbagai senyawa bioaktif. Kromatografi kolom memainkan peran penting dalam analisis obat alami. Dengan mengoptimalkan kondisi kromatografi dan memilih fase gerak yang sesuai, pemisahan yang efisien dan penentuan komponen aktif dalam obat -obatan alami dapat direalisasikan. Sebagai contoh, metode kromatografi ini digunakan untuk memisahkan dan menentukan komponen aktif obat herbal Cina, seperti flavonoid dan saponin, untuk memahami jenis dan kontennya, dan untuk memberikan dukungan kuat untuk kontrol kualitas, pengembangan dan pemanfaatan obat herbal Cina.
Keuntungan dan Tantangan Kromatografi Kolom HPLC dalam Analisis Obat
Metode kromatografi memiliki keunggulan efisiensi pemisahan yang tinggi, sensitivitas tinggi, rentang aplikasi yang luas dan tingkat otomatisasi yang tinggi dalam analisis obat. Namun, dalam aplikasi praktis, itu juga menghadapi beberapa tantangan. Misalnya, pretreatment sampel sangat menuntut untuk memastikan kemurnian dan stabilitas sampel; Biaya analitik yang tinggi, termasuk perolehan instrumen, pemeliharaan, kromatografi dan konsumsi fase gerak; Selain itu, untuk beberapa komponen dengan polaritas yang kuat atau berat molekul besar, HPLC mungkin tidak dapat sepenuhnya memisahkan atau mendeteksi dengan buruk. Oleh karena itu, dalam aplikasi praktis, metode analisis yang paling tepat harus dipilih sesuai dengan persyaratan kualitas obat tertentu dan situasi aktual.
Outlook di masa depan
Dengan kemajuan sains dan teknologi dan pengembangan teknologi kromatografi cair kinerja tinggi, penerapannya dalam analisis obat akan lebih luas. Di satu sisi, pengembangan bahan fase stasioner baru akan sangat memperluas rentang aplikasi kromatografi cair kinerja tinggi dan meningkatkan efisiensi dan selektivitas pemisahan. Di sisi lain, instrumen HPLC akan lebih cerdas dan otomatis, memantau status kolom secara real time melalui sensor terintegrasi, memungkinkan pemeliharaan prediktif, mengurangi downtime, dan mengoptimalkan proses eksperimental. Selain itu, dikombinasikan dengan teknologi analisis data besar, sistem dapat secara otomatis menyesuaikan parameter operasi agar sesuai dengan kondisi pemisahan terbaik dari sampel yang berbeda, meningkatkan efisiensi eksperimental dan keandalan hasil. Kemajuan ini akan memberikan alat analitik yang lebih efisien, akurat dan andal untuk analisis obat, mendorong pengembangan penemuan obat dan kontrol kualitas.
Singkatnya, kromatografi semacam ini memainkan peran penting dalam analisis obat dan memiliki prospek aplikasi yang luas. Dengan terus mengoptimalkan kondisi kromatografi, memilih fase seluler dan stasioner yang sesuai, memperkenalkan teknologi dan peralatan deteksi baru, lebih lanjut meningkatkan akurasi dan keandalannya dalam analisis obat, dan memberikan dukungan yang lebih kuat untuk pengembangan obat, kontrol kualitas dan penggunaan obat klinis.
Kelebihan dan Demerit
Keuntungan
Pemisahan yang efisien
Kromatografi kolom HPLC menggunakan pompa infus bertekanan tinggi dan fase stasioner efisiensi tinggi, yang membuat efisiensi kolom jauh lebih tinggi daripada kromatografi cair klasik, dan dapat mewujudkan pemisahan campuran kompleks yang efisien.
Sensitivitas tinggi
Dilengkapi dengan detektor sensitivitas tinggi, seperti detektor ultraviolet, detektor fluoresensi, dll., Dapat mendeteksi konsentrasi sampel yang rendah, yang sangat penting untuk analisis jejak.
Banyak digunakan
Ini tidak dibatasi oleh volatilitas dan stabilitas termal sampel, dan dapat menganalisis bahan organik dengan titik didih yang tinggi, stabilitas termal yang buruk dan massa molekul relatif besar, dan memiliki berbagai aplikasi.
Pilihan yang bagus
Ada banyak jenis fase gerak, dan selektivitas pemisahan dapat ditingkatkan dengan mengubah jenis dan komposisi fase gerak untuk memenuhi persyaratan analitik dari berbagai sampel.
Tingkat otomatisasi yang tinggi
Sebagian besar instrumen HPLC modern dilengkapi dengan sampler otomatis dan prosesor data, yang dapat mewujudkan otomatisasi analisis dan meningkatkan efisiensi analisis.
Contoh pemulihan itu mudah
Sampel tidak dihancurkan setelah melewati kolom, dan satu komponen dapat dikumpulkan atau disiapkan, yang nyaman untuk percobaan atau aplikasi berikutnya.
Kekurangan
Harga dan biaya pemeliharaan harian kromatografi cair tinggi, termasuk penggantian kolom, konsumsi fase gerak dan kalibrasi reguler instrumen.
Meskipun lebih cepat dari kromatografi cair klasik, waktu analisis HPLC masih relatif lama dibandingkan dengan kromatografi gas, terutama untuk pemisahan dan analisis sampel kompleks.
Meskipun instrumen HPLC sangat otomatis, operasi dan pemeliharaan instrumen masih membutuhkan tingkat keahlian dan pengalaman tertentu. Selain itu, pra-pemrosesan sampel bisa rumit.
Karena adsorpsi ireversibel dari beberapa senyawa pada fase diam, senyawa ini mungkin tidak terdeteksi secara efektif, sehingga mempengaruhi keakuratan analisis.
Pemisahan LC sering sangat dipengaruhi oleh suhu kolom, dan kondisi suhu yang konsisten perlu dipertahankan untuk mendapatkan hasil yang dapat diulang, yang meningkatkan kompleksitas dan biaya percobaan.
Tindakan pencegahan dalam penentuan konten obat
 |
 |
 |
Metode ini memiliki banyak tindakan pencegahan untuk penentuan konten obat, yang sangat penting untuk memastikan keakuratan dan keandalan hasil penentuan. Berikut adalah beberapa pertimbangan utama:
Perbedaan kolom akan mempengaruhi perilaku retensi obat, bahkan jika panjang kolom, diameter bagian dalam, ukuran partikel dari kolom yang sama, karena sifat yang berbeda dari pengisi, waktu retensi dan jenis puncak obat mungkin sangat berbeda. Oleh karena itu, kolom yang sesuai harus dipilih sesuai dengan sifat obat dan kebutuhan pemisahan.
Kolom harus dipertahankan secara teratur untuk menghindari kontaminasi dan penyumbatan untuk memastikan kinerja pemisahan yang baik.
PH garam penyangga dari fase gerak memiliki efek yang signifikan pada perilaku retensi obat dan bahkan dapat mengubah urutan memuncak beberapa obat. Oleh karena itu, ketika mengoptimalkan fase gerak, perhatian khusus harus diberikan pada nilai pH garam penyangga.
Komposisi fase gerak juga mempengaruhi efek pemisahan obat. Sebagai contoh, dalam penentuan persiapan multivitamin, perubahan rasio relatif natrium heksanesulfonat dan natrium heptana sulfonat dalam fase gerak akan mempengaruhi waktu retensi dan bentuk puncak masing -masing komponen. Oleh karena itu, komposisi fase gerak yang sesuai harus dipilih sesuai dengan sifat obat dan kebutuhan analitik.
Proses penanganan sampel harus memastikan keterwakilan dan stabilitas sampel untuk menghindari degradasi atau kontaminasi sampel selama pemrosesan.
Saat menimbang sampel, metode aditif harus digunakan untuk menimbangnya pada satu waktu untuk memastikan keakuratan penimbangan. Pada saat yang sama, operasi penimbangan harus distandarisasi untuk menghindari kebocoran.
Kualitas zat referensi memiliki pengaruh langsung pada hasil penentuan konten. Oleh karena itu, kualitas konten yang andal dan akurat harus dipilih.
Produk kontrol harus disimpan sesuai kebutuhan untuk menghindari degradasi atau kontaminasi. Jika produk kontrol disimpan di lemari es, itu harus dihangatkan dalam oven pengeringan sebelum ditimbang.
Jenis detektor yang tepat harus dipilih sesuai dengan sifat obat dan kebutuhan analitik, seperti detektor ultraviolet, detektor fluoresensi, dll.
Detektor harus dikalibrasi secara berkala untuk memastikan keakuratan hasil pengukurannya.
Analisis statistik yang wajar dari data pengukuran untuk memastikan keandalan dan pengulangan hasil. Misalnya, standar deviasi relatif (RSD) dari area puncak dapat dihitung untuk mengevaluasi ketepatan hasil pengukuran.
Saat menghitung konten, metode yang andal seperti standar eksternal atau internal harus digunakan, dan linearitas kurva standar harus dipastikan.
Saat membangun metode penentuan konten baru, verifikasi metodologis harus dilakukan, termasuk spesifisitas, linearitas, jangkauan, presisi, akurasi, daya tahan dan sebagainya.
Verifikasi metodologis adalah cara penting untuk memastikan bahwa metode pengukuran bersifat ilmiah, masuk akal dan dapat diandalkan.
Pastikan instrumen tetap stabil selama proses analisis, terutama ketika melakukan analisis multi-pin, perhatikan untuk mengamati apakah nilai respons dan bentuk puncak instrumen stabil.
Jika data abnormal terjadi selama proses analisis, itu harus diperiksa dan dihilangkan dengan hati-hati, dan dianalisis ulang jika perlu.
Tag populer: Kromatografi Kolom HPLC, Produsen Kromatografi Kolom HPLC China, Pemasok, Pabrik
Sepasang
Kolom kromatografi industriBerikutnya
Kolom kromatografi gravitasiKirim permintaan
