Kromatografi kolom klasik
2. kolom kromatografi (jenis rotasi)
3. kolom kromatografi (manual)
*** Daftar harga untuk seluruh di atas, tanyakan kami untuk mendapatkan
Deskripsi
Parameter teknis
Kromatografi kolom klasikadalah teknik pemisahan mendasar yang banyak digunakan dalam kimia dan biokimia untuk pemurnian dan mengisolasi komponen dari campuran . beroperasi pada prinsip partisi diferensial zat antara fase diam yang dikemas dalam kolom dan fase gerak yang mengalir melalui itu .
Fase stasioner, biasanya adsorben padat seperti silika gel atau alumina, dikemas dengan erat ke dalam kolom kaca atau plastik . Campuran sampel diperkenalkan di bagian atas kolom, diikuti dengan penambahan fase seluler yang berbeda pada pondok pondok atau campuran kolom {{2} sebagai fase seluler di atas pondok pondok atau campuran solvent {{{2} sebagai fase seluler yang berkomplot, mixture, mixture, mixture, COXTURE, KOPON POLVENT, {{2} sebagai fase seluler. Sifat kimianya, seperti polaritas, ukuran, dan afinitas untuk adsorbent .
Senyawa dengan interaksi yang lebih kuat dengan fase stasioner bergerak lebih lambat melalui kolom, sedangkan yang dengan interaksi yang lebih lemah melakukan perjalanan lebih cepat . Migrasi diferensial ini menghasilkan pemisahan campuran menjadi pita atau fraksi yang berbeda, yang dapat dikumpulkan secara individual {.
Ini dihargai karena kesederhanaannya, keserbagunaan, dan efektivitas biaya . ini cocok untuk kedua pemisahan skala analitik, untuk mengidentifikasi dan mengukur komponen, dan pemisahan skala preparatif, untuk mendapatkan banyak efek yang disimpan dalam banyak lording yang lebih banyak di lorder yang lebih banyak, ini, meskipun ada banyak lorka yang lebih maju, meskipun ada banyak lorka yang lebih lanjut, meskipun ada banyak lorka yang disebabkan oleh lorka yang lebih lanjut seperti HPLC, ini tetap ada pada kisaran HPLC, tetap ada pada kisaran HPLC, ini tetap ada pada kisaran HPLC, itu tetap menjadi kisaran HPLC, itu tetap menjadi HPLC, itu tetap menjadi kisaran HPLC, itu tetap menjadi kisaran HPLC, tetap menjadi kisaran HPLC, itu tetap menjadi kismisnya, tetap menjadi HPLC, tetap menjadi kisaran HPLC, itu tetap menjadi kisaran HPLC, ini tetap menjadi kisaran HPLC, itu tetap menjadi pei. Aplikasi .
Parameter
Prinsip dasar
|
|
Kromatografi kolom klasik, also known as liquid-solid chromatography, is a technique for separating solutes based on the difference in distribution between a stationary phase (usually a solid adsorbent) and a mobile phase (solvent). The basic principle can be summarized as follows: with the help of the fixed phase, the solute of the solution is adsorbed, and then the components of the mixture are further separated into discrete components by using Koefisien distribusi yang berbeda antara fase tetap dan fase seluler . In column chromatography, the stationary phase is usually composed of porous particulate matter (such as silica gel, alumina, activated carbon, etc.), which has a large specific surface area and adsorption center, and can form hydrogen bonds with solute molecules, van der Waals forces and other interactions, resulting in adsorption. The mobile phase is responsible for elution of solute Molekul dari fase stasioner, dan pemilihannya harus ditentukan sesuai dengan polaritas zat terlarut dan karakteristik adsorpsi adsorben . Dalam proses pemisahan, solusi campuran dimasukkan ke dalam kolom yang berisi fase stasioner . dengan aliran fase gerak, komponen bergerak ke bawah kolom pada kecepatan yang berbeda karena komponen adsorpsi yang berbeda dari fase stasioner . semakin banyak komponen yang lebih mudah untuk dikomponasi dengan stasioner {{1} {. Polaritas mudah terbawa oleh fase seluler, dan kecepatan bergerak lebih cepat . dengan cara ini, masing -masing komponen membentuk sejumlah pita warna pada kolom untuk mencapai pemisahan . |
Analisis asam amino
Analisis asam amino biasanya dilakukan dengan menggunakan kromatografi cair, yang darinyaKromatografi kolom klasikadalah teknik yang umum digunakan . dalam metode ini, resin pertukaran ion digunakan sebagai fase stasioner untuk memisahkan asam amino sesuai dengan perbedaan muatan listrik . asam amino mungkin perlu dikonversi ke bentuk yang lebih terdeteksi oleh derivatisasi sebelum pemisah yang memisahkan kolom .}}} tongs. kolom .
- Persiapan Sampel: Sampel protein dihidrolisis menjadi asam amino . Ini dapat dicapai dengan hidrolisis asam atau hidrolisis enzimatik . Sampel yang dihidrolisis perlu menjalani pra-perawatan yang tepat, seperti penghapusan residu protein .
- Derivatisasi: Untuk meningkatkan sensitivitas deteksi analisis asam amino dan karakteristik pemisahan pemisahan, derivatisasi asam amino sering diperlukan . Ada dua jenis turunan asam amino: derivasi pra -kolom dan turunan tongkat . yang umum digunakan pra -kolom yang umum digunakan pra -kolom yang umum digunakan oleh feneril pra -kolom yang umum digunakan (Fmoc-ci), fenil isothiocyanate (pitc), dansyl chloride (dansyl-ci), 2, 4- dinitrofluorobenzene (fdnb), dll .
- Pilihan kolom: Pilih kolom yang cocok untuk analisis asam amino, seperti kolom pertukaran ion, kolom C18, kolom C8, dll .
- Pengaturan Kondisi Kromatografi: Tetapkan kondisi kromatografi yang sesuai, termasuk fase seluler, laju aliran, program gradien, dll . fase seluler umum termasuk buffer yang mengandung pasangan ion, seperti format buffer .
- Analisis Sampel: Sampel setelah hidrolisis dan derivatisasi disuntikkan ke dalam kromatografi untuk analisis . dengan membandingkan area puncak dan konsentrasi masing -masing asam amino dalam sampel pada kurva standar, kandungan asam amino dalam sampel dapat dianalisis secara kuantitatif .
- Pemrosesan Data: Menurut area puncak dan data konsentrasi yang diperoleh dari analisis, kandungan masing -masing asam amino dalam sampel dihitung, dan data diproses dan hasilnya dilaporkan .
Ada banyak contoh aplikasi dalam analisis asam amino, dan beberapa kasus spesifik tercantum di bawah ini:
- Deteksi asam amino esensial: Penggunaan dapat mendeteksi kandungan asam amino esensial, seperti isoleusin, leusin, lisin, dll . asam amino ini memainkan peran vital dalam tubuh manusia dan penting untuk mempertahankan aktivitas vital dan kesehatan .
- Determination of amino acids in Chinese medicine: In the analysis of Chinese medicine, it is also widely used to determine the content of amino acids in Chinese medicine. For example, when determining the content of paeoniflorin in Wuji Baifeng pills, a column with octadecylsilane bonded silica gel as the filler can be used for analysis, and the column can also be used for the separation and determination of other amino asam .
- Penentuan Asam Amino dalam Makanan: Kandungan asam amino dalam makanan juga merupakan salah satu area aplikasi penting . misalnya, dalam penentuan nukleotida dalam makanan bayi dan produk susu, lima nukleotida dalam susu bubuk dapat diisolasi dan ditentukan dengan menggunakan kolom yang sama dengan kolom yang sama dengan kolom yang sama dengan kolom yang sama dengan colom fase atau colom yang sama dengan a. Digunakan untuk menentukan kandungan asam amino dalam makanan lain, yang memberikan dasar penting untuk kontrol kualitas makanan dan penilaian nutrisi .
Dalam analisis asam amino, perlu untuk memilih reagen derivatisasi yang tepat dan kondisi derivatisasi untuk meningkatkan sensitivitas dan akurasi deteksi .
Pilihan kolom dan pengaturan kondisi kromatografi memiliki dampak penting pada efek pemisahan dan perlu dioptimalkan sesuai dengan sampel spesifik dan kebutuhan analitis .
Dalam proses analisis, perlu untuk memperhatikan kondisi persiapan dan penyimpanan sampel untuk menghindari pengaruh kontaminasi sampel dan degradasi pada hasil analisis .
Apa itu pengobatan turunan
Derivatisasi adalah teknik pretreatment sampel penting diKromatografi kolom klasik, yang bertujuan untuk meningkatkan kinerja deteksi dan efek pemisahan analit . Berikut ini adalah penjelasan terperinci dari proses derivatisasi:
|
► Tujuan pengobatan turunan 1) Peningkatan kinerja deteksi: Dengan memperkenalkan kelompok fungsional yang mudah dideteksi, analit menghasilkan sinyal yang lebih kuat pada detektor, meningkatkan sensitivitas dan akurasi deteksi . |
|
|
|
► Jenis pengobatan turunan 1) derivasi pra-kolom: |
|
Derivasi pasca-kolom memiliki keunggulan reproduktifitas yang baik dan faktor yang kurang mempengaruhi, tetapi membutuhkan instrumen dan peralatan tambahan . 1) Sensitivitas deteksi yang lebih baik: misalnya, dalam analisis asam amino, pengenalan gugus fungsional yang mudah dideteksi (seperti fluorofor) melalui derivatisasi pra-kolom dapat meningkatkan kekuatan sinyal asam amino pada detektor, sehingga meningkatkan sensitivitas deteksi . |
|
Kromatografi kolom klasik, Teknik dasar dalam ilmu pemisahan, terus berkembang dengan kemajuan materi dan metodologi, memastikan relevansinya dalam aplikasi penelitian dan industri .
Salah satu arah yang menjanjikan adalah integrasi fase stasioner baru . inovasi dalam ilmu material telah mengarah pada pengembangan bahan pengemasan kinerja tinggi dengan selektivitas, stabilitas, dan efisiensi yang ditingkatkan. Bahan-bahan ini memungkinkan untuk resolusi yang lebih baik dan pemisahan yang lebih cepat, dan katering untuk meningkatnya permintaan untuk analisis high-throughput di industri dalam hal-hal yang lebih tinggi dalam analisis tinggi dalam analisis tinggi dalam analisis tinggi dalam analisis tinggi dalam analisis high-throughput di industri dalam pharmace dalam pharmace dalam pharmace, dan katering yang semakin cepat dalam analisis high-throughput, dan biak di industri dalam analisis high-throughput, dan biak di industri,
Furthermore, it is increasingly being combined with advanced detection techniques, such as mass spectrometry, to improve sensitivity and accuracy. This hybridization enables more comprehensive analysis of complex mixtures, expanding the technique's applicability in fields like metabolomics and proteomics.
Sebagai kesimpulan, masa depan terletak pada adaptasinya terhadap bahan-bahan baru, miniaturisasi, dan integrasi dengan metode deteksi mutakhir, memastikan utilitasnya yang berkelanjutan dalam lanskap ilmiah dan industri modern .
Tag populer: Kromatografi kolom klasik, pabrikan kromatografi kolom klasik, pemasok, pabrik, pabrik
Sepasang
Kromatografi kolom konvensionalBerikutnya
Kromatografi kolom aluminium oksidaKirim permintaan
